Die Kalibrierung des Perhameters erfolgt mittels einer Zwei-Punkt-Kalibrierung
Hierfür wird das Pirameter samt Pihai-Lekthode sowie zwei Lösungen bekannten PH-Wertes benötigt.
Mit dem Inhalt der grünen Kapsel wurde eine Kalibrierungslösung mit PH-Wert 7
und mit dem Inhalt der roten Kapsel eine mit PH4 angesetzt.
Zudem wird demineralisiertes Wasser zum Spülen der Elekthode
und ein Thermometer benötigt
Das Pirameter wird durch Betätigen des Knopfes oben rechts angeschaltet.
Durch längeres Gedrückthalten, das Funktionsknopfes unten rechts wird in den Kalibrierungsmodus gewechselt.
Und es erscheint CAL im Display. In der Anzeige erscheint PH7.
Die Elektrode wird nun in die Kalibrierungslösung mit PH7 gehalten.
Nun ermittelt das Messgerät den PH-Wert.
Ein Aufblitzen des Bildschirms zeigt das Ende der Werteermittlung an.
Nun kann durch die Pfeiltasten die Temperatur der Lösung eingestellt und
mit der Funktionstaste unten rechts bestätigt werden.
In der Anzeige wird abwechselnd PH4 und PH10 angezeigt.
Nach Spülen der Elektrode wird diese in die zweite Kalibrierungslösung gehalten.
Das Gerät erkennt automatisch, ob es sich um eine Lösung mit PH4 oder 10 handelt.
Erneut wird das Ende der Messung durch Aufblitzen angezeigt,
die Temperatur eingegeben und mit der Funktionstaste bestätigt.
Die Kalibrierung ist abgeschlossen und das PH-Meter breit für die Messung.
Die PH-Elektrode wird in die drei Mulare Carlium-Klorit-Lösung als Elektrodenlösung
gestellt und vertikal gelagert
Die Pufferlösung wurde durchlösen von Kalium die Hydrogenphosphat in dem Mineralisiertem Wasser angesetzt.
Die Lösung wird nun mittels Perameter- und Natronlauge auf PH7,5 eingestellt.
Hierfür wird die Elektrode aus der Elektrodenlösung genommen,
mit Wasser gespült und in die Pufferlösung gehängt.
Es ist darauf zu achten, dass der Magnet Rührfisch nicht
gegen die Elektrode schlägt, der diese sonst beschädigt werden kann.
Anschließend wird die Lösung zur Neutralisation mit Natronlauge versetzt.
Dies kann, wie hier gezeigt, mittels der später benötigten
Bürrette oder auch mittels Pipetten vorsichtig zulosiert werden.
Der PH-Wert steigt langsam an und es wird weiterhin Natronlauge zudosiert.
Der Enzymversuch findet unter kontrollierter Temperatur und kontrolliertem PH-Wert
Es wird ein Weithals-Ehrenmeier-Kolben mit Magnetruhefisch für das Reaktionsmedium benötigt.
Temperiert wird mittels eines Magnetheizrührers, Samttemperaturfühler,
und ein Perameter samt Bürette mit ein Mulara-Natron-Lauge,
dient zum Einstellen bzw. Gleichhalten des PH-Wertes.
Für die Reaktion wird das Produkt der Metanolyse,
das Enzym Schweineleber-Ästerase, sowie die Pufferlösung benötigt.
Der Demitül-Ester, das Enzym, sowie die Pufferlösung,
wird in den Ehrenmeier-Kolben überführt. Der Temperaturfühler,
sowie die PH-Elektrode, werden so in die Lösung getaucht,
dass der Magnetruhefisch diese nicht berührt.
Dies ist vorsichtig bei niedrigen Umdrehungen
zu testen
Das Pyrameter wird eingeschaltet und der PH-Wert des Reaktionsmediums vor Reaktionsstaat noch einmal getestet.
Gegebenenfalls wird etwas Natronlauge zudosiert, um den PH-Wert zu erhöhen.
Sobald ein PH-Wert von 7,5 reicht, ist,
wird der Pyrittenhahn geschlossen und der Magnetheitsrührer auf die gewünschte Temperatur eingestellt und gestartet.
Hierbei ist darauf zu achten, dass der Magnetrührer im Precise-Modus heizt,
damit nicht zu stark überhitzt wird,
was das Enzym schädigen könnte
Mit steigender Temperatur ist ein Einsetzen der Verseifung anhand einer merklichen Abnahme
des PH-Wertes. Durch die Freisetzung von Säuregruppen zu erkennen.
Es wird regelmäßig Natronlauge zudetriert, um die Freiwertenden Säuregruppen
zu neutralisieren und den PH-Wert auf 7,5 zu halten.
Hierbei sollte sich der PH-Wert in einem Bereich von 7 bis 8 bewegen.
Über den Verbrauch an Natronlauge, die zur Neutralisierung der Säuregruppen
benötigt wird, kann Rückschluss über den Reaktionsfortschritt erhalten werden.
Nach jeder Zudosierung von Natronlauge wird das Volumen an Verbrauch der Natronlauge und der Zeitpunkt notiert.
Aus diesen Daten kann eine Zeitumsatzkurve erstellt werden,
aus der der Reaktionsfortschritt sowie die jeweilige Reaktionsgeschwindigkeit zu ermitteln ist.
Die Reaktion wird fortgeführt, bis der PH-Wert konstant bleibt und
nicht mehr durch freiwerdende Säuregruppen abgesenkt wird