Musik Wie funktioniert eigentlich eine SDS-Page? Page steht für Pool Acronamit,
Ge-Elektroporese und SDS für Sudum, Dudizysulphat an Detekins,
was sie dem Gel beimischen, damit die Methode auch funktioniert.
Und mit der Kammern Proteine analysieren bezüglich ihrer Größe und ihrer Reinheit und hier auf dem Labor,
durch den wir alles, was wir brauchen,
für diesen Versuch, einmal die Geräte und die Chemikalien.
Los geht's hier mit den Glasplatten, Alox-Platten und Spacern,
mit denen werden so Gel-Sandwiches gegossen, mit denen dann die Gel hergestellt werden.
Hier ist unsere Gießkammer, darin wird alles zusammengebaut,
um die Gele dann zu gießen.
Hier sehen wir noch Camel, für die Aussparung der Probentaschen,
in denen wir unsere Proteinproben auftragen können.
Hier die Lektroporisekammer, in dem wird er versucht,
dann nachher durchgeführt. Der Deckel mit den Kabeln für die Elektrodenanschlüsse
. Und hier sind wir die Chemikalien, einem Acryllamit,
muss immer 30-prozentig sein, ganz wichtig.
Trenngehpuffer, Sammelgelpuffer, Temmet und Ammonium Persof hat als Katalysatoren
für die Reaktion. Hier unsere Commercifärbe-Lösung,
zum Färben der Skills, hier ein Endfärber, zum Entfärben,
damit die Putinbad mal sichtbar werden. Hier noch ein Heizblock,
weil wir die Probe nachher aufkochen müssen vor dem Auftragen und ein Schüttler,
mit dem wir das ganze Färben dann durchführen können.
Hier unser Proteinproben, die wir analysieren möchten und noch Puffer,
die wir benötigen für die ganze Geschichte und dann können wir
nicht loslegen
Zuerst müssen wir die Geele,
die Geele-Sandwiches zusammensetzen und das Ganze in den Gießstand reinsetzen.
Und vorher auch vor allen Dingen Putzen mit Ethanol,
damit das alles fett und vor allen Dingen auch proteinfrei ist,
damit nicht falsche Signale nachher zu sehen hingehe.
Und dafür müssen wir Handschuhe anziehen, damit wir auch von unseren Fingern
keine Protein- und Fettreste wieder an die ganzen Teile ransetzen.
Hier haben wir Ethanol, das ist 70-prozentig.
Hier haben wir Graupapier und jetzt ist es im Prinzip
wie Fensterputzen
Man nimmt so eine Alox-Platte, die sind sehr empfindlich,
nicht runterfallen lassen oder sowas. Und hier diese Kanten müssen
auch alle vorhanden sein, die brechen gern mal ab.
Wenn die abgebrochen sind, können wir die mehr benutzen.
Und jetzt wird das hier mit dem Tuch gereinigt.
Und dann hier in den Giezstand reingelegt.
Ich mache es erst mal nur hier oben hin,
damit ich gleich mal zeigen kann, wie das genau aussieht.
Dann kommen hier zwei Spacer. Die haben hier so
eine Kante und diese Kante wird nach außen gelegt.
Also eine Kante nach dort. Die zweite Kante,
oder der zweite Spacer, auch wieder hier die Kante
nach außen
Und dadurch kommt jetzt eine Glasplatte, auch die nochmal putzen,
zumindest auf der einen Seite. Und es wird hier raufgelegt.
Und das ist jetzt ein Geels-Hymbisch sozusagen. Wir stehen aus Alox-Platte,
die beiden Spaceer allseitig Abstandhalter und der Glasplatte oben auf.
Und das liege ich jetzt hier rein. Vorher kommen
noch zwei Kunststoffscheiben drunter als Abstandhalter. Und jetzt kommt,
das erste Gils, dann witscht dort rein,
immer darauf achten im Prinzip, dass die Spacer richtig sitzen,
dass sie nicht verkantet sind,
sonst klappt das Ganze nachher nicht.
Und jetzt baue ich insgesamt fünf Sandwiches dort rein.
Ich kann also fünf Pulle-Kulle-Mitgele gleichzeitig gießen.
Immer wieder alles Feuer. Sauber machen. Und immer in
der gleichen Reihenfolge, Alox-Platte,
Spacer,
Musik Jetzt ist das Ganze fertig. Ich halte das mal
mit dem Daumen fest, dass das nicht alles rausfällt.
Hier außen muss so eine Gummidichtung sein, die ist ganz,
ganz wichtig, wenn die nicht drin ist,
dann läuft gleich die ganze Flüssigkeit raus beim Gießen.
Und die müssen auch bis oben hingehen sozusagen,
darf nicht schief drin sitzen.
Hier unten ist so ein rotes Gummi-Dreieck.
Auch das muss drin sitzen in dieser Gießkammer
Und hier ist so eine kleine Aussprachung, so eine kleine Vertiefung.
Und dadurch sind alle Gele gleich mit deiner Verboten bezüglich der Flüssigkeit.
Und ich kann gleich einfach mal meine Lösung reingießen.
Und egal, wo ich es reingehst, so oben,
alle Gele hat noch hier den gleichen Höhenstand, den gleichen Flüssigkeitsstand sozusagen.
Hier ist meine Platte zum Schließen sozusagen dieser Gießkammer,
lege ich drauf, habe hier zwei Klammern,
setzt die an die Seite ran.
Eine rechts, eine links. Und jetzt ist es alles
fertig. Ich kann das einmal kurz über den Kopf halten,
um zu schauen, ob das alles fest sitzt.
Da darf nichts rausfallen,
sieht gut aus
Einmal kurz oben reinschauen, dass man sehen kann, dass alle Gele korrekt sitzen,
dass die Spacer richtig fixiert sind an den Seiten und dass
dort nichts verrutscht ist und damit auch alle Gele richtig gegossen werden können.
Sieht alles sehr gut aus. Und damit haben wir den Giestand schon
mal zusammengebaut. Das Polychula-Mitglied wird in zwei Schichten gegossen,
unten kommt das Trenngel und darauf dann das Sammelgel,
womit ich weiß, wie hoch das Trenngel gegossen werden muss,
kann ich hier so einen Probenkram nehmen,
kann den vorne in den ersten Sandwich reinsetzen,
das ist ein bisschen fummelig, aber mit ein bisschen Übung geht das hin,
geht das ganz gut.
Und jetzt sehe ich im Prinzip, dass Der kam richtig sitzt.
Hier, die Kanten sind, liegen auf an den Seiten.
Es ist nicht schief. Jetzt sich auch die Probentaschen später.
Und es muss sich ein Zentimeter unterhalb des Kammes einen Strich machen mit einem Stift.
So ungefähr ein Zentimeter. Und das ist jetzt sozusagen die
Höhe, in der ich meinen Trennen gehe, gieße.
Und die Markierung brauche ich gleich sozusagen für das Einfüllen.
Um jetzt das Gel herzustellen, brauche ich einmal Acrylamid-Lösung, 30-prozentig.
Ganz wichtig. Manchmal gibt es auch andere Prozentigkeiten,
die im Labor vorhanden sind, immer darauf achten,
dass es die richtige Konzentration ist.
Und schon mal Gefäß öffnen
Gleich habe ich nur noch eine Hand frei. Ich brauche Trenngelpuffer,
auch schon mal öffnen. Und dann Wasser und ein Gefäß,
ein leeres Becherglas, um das Ganze rein zu diplotieren.
Und dann habe ich hier noch Temmett und Monyumpersofa ziehprozentig gelöst,
als Katalysatoren für die Polymerisation.
Hier ist eine Pipi-Tier-Hilfe und hier ist eine 10-Milliliter-Pi-Pette.
Die muss sich immer so hindrehen, dass ich,
wenn ich damit arbeite, auch die Gratuierung sehen kann,
dass ich weiß, wie viel ich piepetiere.
Und ich brauche jetzt 15-Milliter-Acrylamid, dann eine 10er,
kann eine 15 Liter reinpassen, finde ich,
muss ich zweimal pipetieren und pipetiere zweimal siebeneinhalb Milliliter
Das sind die ersten siebeneinhalb. Und das sind die
zweiten siebeneinhalb. Als nächstes pipetiere ich das Wasser,
weil ich ja jetzt mal pette kontaminiert habe mit dem Acryllamid,
wenn ich jetzt mit Wasser pipertiere,
wird die automatisch gespült und ich musste nicht extra reinigen für den Puffer,
den ich später pipetieren muss.
Von dem Wasser nämlich 4,
7,4 Mädelliter
Und vom Trenngehpuffer 7,5 Milliliter.
Upst. Von dem Temmet brauche ich 24 Mikroliter und von
dem amonympersofat
Das ist das Tammett. So, und ganz zum Schluss
mit der Pipettenspitze umrühren, damit alles auch gut durchmischt wird.
Und natürlich immer beim Arbeiten mit Acrylamid Handschuhe tragen,
weil die Substanz toxisch ist und nicht an die Haut kommen soll natürlich.
Um jetzt das Gel in die Energiestand einzufüllen,
muss ich in den Kamm rausziehen.
Und das kann ich von oben einfach, das Acrylamid reingießen,
bis zu meinem schwarzen Strich,
bis zur Markierung,
die ich gemacht habe
Sieht man, wie das langsam hochläuft? Jetzt einmal klopfen,
falls Luftblasen drin sind, die dann nach oben gehen würden.
Und immer diesen Gichtstand am besten auf ein Graupapier stellen,
falls mal was überläuft oder sowas,
das gleich aufgesogen wird und nicht auf die Arbeitsflatte,
auf die Arbeitsplatte kommt.
Jetzt ist das Trennengel sozusagen eingefüllt in meine,
im Agil-Gieß-Kammer
Und jetzt muss ich noch die Dealüberschichten, entweder mit Wasser
oder mit Isopropanolen. Ich mache es mal mit Wasser.
Und ich muss jetzt immer gleichmäßig jedes einzelne Dealüberschicht,
mit dem wir jetzt immer einen Milliliter, und ganz wichtig,
dass ich das gleichmäßig mache, von Gel zu Gel,
weil wenn ich das Hintere jetzt vollfüllen würde,
würden die anderen nach oben rutschen sozusagen,
weil durch diesen Steg hier miteinander verbunden sind.
Deshalb muss ich das gleichmäßig machen,
damit sozusagen die Höhe des Trenngels möglichst bei allen Gelen
gleich bleibt
Jetzt noch nämlich das Hinterregal, geh dort langsam rüber.
Dann das zweite. Und bei den anderen verfahre ich genauso
Jetzt wiederhole ich diesen Vorgang, fange wieder hinten an mit
dem nächsten Mädel-Lieter, Wasser, den ich rübergebe.
Dann kommt das zweite. Das dritte. Das mache ich
so lange mit dem Wasser, bis,
die bis oben hin gefüllt sind, die Gele.
Und das ist wichtig, damit meine Gele um eine
gerade Oberfläche bekommen und nicht austrocknen.
Deshalb muss ich Wasserüberschichten. Und damit haben wir auch das erledigt.
Jetzt kann das Trenngeld auspolemerisieren und der Prozess dauert ungefähr eine Stunde.
Sagen wir, kann man nichts machen,
musst du stehen lassen und dann geht es weiter mit
dem Gießen des Sammelgeals
Nach der einstündigen Polymerisation muss ich das Wasser entfernen,
was obendrauf auf meinem Trenngel ist. Und kann einfach über
die Kante gießen. Und den Restwasser lasse ich raus,
weil wenn ich das Ganze über den Kopf stelle,
auf dieses Papier, jetzt kann das dort ruhig zwei,
drei Minuten stehen bleiben.
Und in dieser Zeit kann ich jetzt das Sammigill zusammenpipetieren.
Dafür brauche ich wieder Acryl-Amit. Ich brauche Sammelgelpuffer,
auch schon mal aufdrehen, das Gefäß.
Ich brauche Wasser
Und ein leeres Becherglas, in den ich das reinpipetieren kann.
Ich nehme zwei Milliter Acryl-Amit, das pipetiere ich zuerst.
Da büchte ich als nächstes das Wasser,
da von 9,2 Milliliter. Auch wieder in dieser Reihenfolge,
damit man Pipette gewaschen wird.
Dann kommt der Sammelgildpuffer,
davon 3,75 Milliliter
Von dem Termit brauche ich 15 Mikroliter.
Und das letzte ist noch das Ammonium Persofat.
Da pipetiere ich
60 Mikroliter
Wieder durchmischen wir über eine Pipettenspitze, mit alles gut durchmischt wird.
Und es ist hier das, was da auch rausgelaufen aus
meinem Trennen gehe, was dort überstand.
Und ich sehe hier sehr schön auf Fuhe des Striches,
ist auch mal eine Schicht jetzt des Trenngels.
Und das kann ich oben, das Sammelgeld reinpipetieren,
muss es bei jedem einzelnen Guill Sandwich machen, bis sozusagen die Flüssigkeit überläuft.
Dafür nehme ich die A-Milita-Pipette und pipetiere jetzt Zwei bis drei Milliliter rein,
fang hinten an, dem hintersten Gel,
war das jetzt polemerisiert ist, kann hier nichts mehr über diesen kleinen,
über diese kleine Aussparung sozusagen die Gele verschieben von der Höhle her.
Das muss sich jedes Gel oben einzeln beladen.
Mit dem Sammelgel
Jetzt muss ich, ich käme noch, sauber machen.
Wieder mit Ethanol. Ist das einmal ganz kurz hier
Protein und Fett freimachen. Und immer, wie gesagt,
auch das Ganze, den ganzen Gießstand auf so ein Graupapier stellen,
falls das jetzt überläuft, gleich beim Kämmer reinstecken,
dass es sich dort unten im Graupapier aufsaugt.
Wir sind in die Kämme reingesteckt, in das Sammelgel.
Die sind sehr flexibel. Und man muss immer gucken,
dass die alle wirklich auf eine Ebene sind und in dieses dünne Stallage hineinpassen.
Da muss man immer sehr viel Geduld mitbringen.
So hat sie das hier reingesetzt. Darauf achten,
dass auf beiden Seiten sozusagen an den Seiten aufliegt.
Und ich mache das von hinten nach vorne,
bis ich alle fünf drin habe.
Die Kämmer haben zehn Probentaschen später
Oder die Gele haben zehn Probentaschen,
weil hier zehn Kämme sozusagen sind, Zehnerkämme sind.
Und in jede passen ungefähr 20 Mikroliter maximal rein an Volumen.
Und jede Probentasche. Hier sind alle fünf drin.
Alle sitzen gut an den Seiten und jetzt kann es
Sammel geben, polimerisieren und die Polimerisation dauert zwei Stunden ungefähr
Unsere zweistündige Polimisation ist vorbei. Das heißt, das Sammelgil ist
jetzt fest geworden. Jetzt kann ich den Giestand auseinanderbauen,
mache zuerst seitlich die beiden Klammern ab. Und jetzt brauche
ich relativ viele Handtuchpapiere, die ich schon mal ausbreite.
Umgleich die Acrylamie-Reste, die dort jetzt überall sind,
so ein bisschen... so ein bisschen dort abzulegen.
Erstmal muss ich jetzt den Deckel seitlich wegschieben,
die euch auf keinen Fall nach oben abnehmen, weil dann kann es sein,
dass ich ein Sandwich an Giseve auseinanderbreche sozusagen und damit ein Gil kaputt mache.
Also einfach zur Seite wegschieben,
das geht ein bisschen schwer, weil es jetzt
relativ fest sitzt
Heute ist er ab und den kann ich hinlegen.
Und jetzt sehe ich hier, mein erstes Guild Savage vorne
mit der Glasplatte und an den Seiten den beiden Spacern.
Und jetzt muss ich sozusagen die Guild Sandwiches auseinander bekommen.
Und das mache ich mit einem Skalpell sehr scharf.
Aufpassung, dass man sich nicht schneidet. Und jetzt gehe ich
mit der Skalpell-Spitze sozusagen hier an der Seite zwischen der ersten Alox-Platte,
die kommt, und der dahinter liegenden Glasplatte.
Damit heble ich das ein bisschen auf.
Gehe dort zwischen
Drück das ein bisschen rein. Und jetzt kann ich es aufhebeln
und habe jetzt sozusagen, okay, das ist schiefgelaufen.
Ich habe es falsch reingesetzt. Ich sehe,
ich habe jetzt hier eine Glasplatte sozusagen mitgenommen und auch einen Kamm,
der jetzt da sozusagen rausgegangen ist.
Ein Beispiel, wie man es nicht machen sollte.
Jetzt kann ich auf jeden Fall aber hier schon mal seitlich
die Acrollaby-Reste abmachen und kann jetzt nochmal hier zwischengehen und
die Glasplatte abmachen
Jetzt habe ich sie. Das war die Glasplatte, die
zum nächsten G gehört. Also Enkel haben wir schon mal
gerade kaputt gemacht. Jetzt kann ich den Kamm rausziehen,
einfach nach hinten wegziehen. Und jetzt kann ich hier einmal
mit dem Skalpell entlangschneiden und die Reste des Acrylamits damit abtrennen.
Einmal an meinem Papier hier abschaben. Und jetzt habe ich
mein erstes Gil sozusagen fertig. Ich muss gleich
noch geputzt werden, das machen wir gleich.
Jetzt kommt das nächste
Das kann ich erst mal hier schon mal, das wäre das Kaputte.
Egal, lassen wir erst mal drin. Also ich mache wieder
mein Skalpell zwischen Alox-Platte und dahinter liegender Glasplatte, hebel das auf.
Jetzt hat es richtig geklappt. Habe ich hier im Prinzip
das Vorderegil, das muss ich jetzt noch mal abmachen,
weil es kaputt gemacht wurde. Das kommt in den Müll,
also nicht in den Hausmüll, aber wird entsorgt das Ganze.
So, mein nächstes Gil sozusagen, wieder an den Seiten,
die Akulomit-Reste, ein bisschen abschaden.
An meinem Graupapier, wieder den Kamm nach hinten wegziehen
Und jetzt wieder mit dem Skalpell, auf der Rückseite,
die Reste, die überstehen, abschneiden.
Und mit einem Graupapier ein bisschen abziehen. Das mache ich
jetzt mit allen meinen Gelen, die ich habe.
Wieder mit dem Skalpell zwischengehen. Aufhebeln. Die Reste hier
an den Seiten abnehmen. Den kamen nach hinten rausziehen.
Die Reste hier. Mit dem Skapell abschneiden,
die überstehen
Mit dem Papier wieder abnehmen, nach oben wegziehen sozusagen.
Und jetzt kommt das Letzte. Das kann ich einfach so raushebeln,
das ist eigentlich am einfachsten,
weil er keine Glast hat dahinter isst,
sondern nur noch diese Kunststoffscheiben, die wir als Füllmaterial hatten.
So, auch hier wieder die Reste an der Seite abmachen.
Dort auch. Den kam nach hinten rausziehen.
Und die überstehenden Reste, mit denen
das Kapell abschneiden
Und dann nach oben wegziehen, nach hinten wegziehen.
Das sind meine vier Gele, die ich jetzt habe.
Man kann auch schön die Probentaschen sehen,
die hier als Aussparung zu sehen sind. Jetzt muss ich
noch die Acrolomie-Dreste entfernen, die auf den Gelen drauf sind.
Die Rückseiten sind häufig noch mit Alcrolomie-Dresten sozusagen behaftet.
Und die würden später Diktoporise stören, weil dann die Kammer
nicht abgedichtet ist. Und das muss ich am besten
unter laufendem Wasserhahn machen mit warmem Wasser
Zum Saubermachen der Gele. Einfach den Wasserhahn anstellen, das
laufendes Wasser rauskommt. Und dann kann ich die Gele so
in die Hand nehmen, klar, immer Handschuhe anziehen natürlich.
Und die sind das aber relativ stabil, auch die Sandwiches.
Man kann jetzt einfach hier mit laufenden warmem Wasser die Pool- und Grünhydreste entfernen.
Erstmal von der Vorderseite. Und dann ganz wichtig von der Rückseite
auch. Weil das wird später an einer Dichtung anliegen.
Und wenn dort noch Akolomidreste sind, dann läuft der Puffer später aus.
Das mache ich mit allen vier Gelen, die ich noch habe.
Eins ist es ja kaputt gegangen leider. Die Restle gehen manchmal
relativ schwer ab. Die Akolomidreste hinten auf der Rückseite mit
der Alox-Platte. Man darf auf keinen Fall mit dem Schwamm
die reinigen, vor allen Dingen nicht mit der Scheuerseite.
Aber es gibt nachher kleine kleine Kratzer auf der Alox-Platte.
Und die würden, wenn man mal später einen Silberverpunkt macht,
mit dem Gel, wenn man nochmal Gele kissen würde,
mit den Alox-Platten würden, die falsche Signalwanden geben.
Von daher niemals irgendwie die Platten zerkratzen. Dadurch wären sie
undrauchbar. Manchmal rutscht auch der Space ein bisschen raus,
wie man hier sehen kann.
Es macht aber gar nichts, kann ich wieder reinschieben.
Und damit sind unsere vier Gele,
alle geputzt und einsatzbereit für die Elektrophoriese